认识白介素试剂盒，细胞系开发流程从这篇文章开始！

359660243

　　白介素试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被白介素捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素呈正相关。细胞系开发流程用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
　　从六个方面认识白介素试剂盒：
　　1.灵敏度：为试剂检出被检物质的低量的能力和试剂对大量样品中阳性检出的能力。
　　2.特异性：常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部分的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
　　3.精密度：一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。
　　4.准确度：通过添加回收实验进行评价。
　　5.安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
　　6.经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，而市场价格比较合理。
　　白介素试剂盒操作步骤：
　　1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
　　2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
　　3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
　　4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
　　5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
　　6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
　　7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。