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FUT8 细胞系培养常见的问题怎么决绝

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论坛元老

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发表于 2023-4-17 22:48:06 | 显示全部楼层 |阅读模式
  FUT8 细胞系培养时,培养基中丙酮酸钠的作用是什么?丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。
  倒置相差显微镜
  倒置显微镜一般构造与普通显微镜一样有物镜目镜光源光路系统等。但倒置显微镜的光源位于在载物台上放,光线由上至下照射到观察物上,物镜则位于载物台下方,观察培养细胞多用放大倍数为 10×和 20×的物镜,目镜为 10×。
  擦拭镜头可用沾酒精/乙混合液或二甲苯的镜头纸或脱脂棉。
  擦拭涂漆表面,可用纱布除去灰尘。若有油渍污垢,用纱布沾少许汽油去除,不能用有机溶剂(如:酒精乙和其它稀释剂)擦拭涂漆表面和塑料部件。
  仪器不使用时,用有机玻璃或聚乙烯罩上,并存放于干燥且没有霉菌滋生的地方。
  物镜和目镜放在有干燥剂的密闭容器中。
  需要注意:
  1、-80度冻存细胞的时间太长,一般如果需要长期保存的话,超过一个月。转入液氮。原有的冻存细胞状态就不好,表现为细胞活力不够,细胞密度不高。
  换液太快,培养体系太大,如果细胞状态不好,保持较小的培养容积,以获得较高的细胞密度。如果培养基还是桃红色,说明细胞的代谢活动很弱,此时不宜换液。不知道你这个细胞是喜欢聚集生长还是离散生长。
  根据条件调节。比如,如果喜欢聚堆长,建议先倾斜培养瓶/皿,2h为一个时间间隔,观察细胞状态,以作调整。
  2、如果当天能见到贴壁的话,说明还是可以的.有时候培养基颜色偏紫,细胞贴壁会有问题的.你核实一下你培养基颜色是否偏碱.如果偏碱,可以适当调高培养箱二氧化碳的浓度.或者换新的培养基.特别是开启过的培养基,适用时间长容易出现这个问题。
  3、细胞冻存过程如果出了问题,复苏细胞溶解要迅速,有时候水浴锅刀38度,甚至40度,目的是让其快速解冻,而且复苏一次的培液血清浓度可以相对高一点,等第二次换液时换回10%。

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